本发明属于植物育种，更具体涉及一种促进狸藻种子萌发及幼苗存活的方法。
背景技术：
1、繁殖是湖泊沉水植物种群分布和丰富度格局变化的关键，繁殖成功是植物适应复杂环境变化的佐证1。在自然条件下，沉水植被的种群重建及生态系统恢复主要依赖其发达的无性繁殖系统，但有性繁殖对于水生植物的作用绝非次要的。有性繁殖是新基因形成和新基因型产生的主要手段，同时，有性繁殖也被认为在物种的长期延续、远距离扩散以及极端事件过后的群落恢复方面发挥重要作用2,3,4。在淡水沉水植物的有性繁殖过程中，种子萌发是繁殖成功的关键过程之一，有性繁殖形成的种子极有可能是沉水植物遭遇极端干扰毁坏后种群恢复的基础5。现已发现，某些沉水植物(如菹草(potamogetoncrispus)、微齿眼子菜(potanogetonmaackianus)等)，其有性繁殖产生的种子在自然条件下萌发率极低，其群落的维持和扩增被迫依靠无性繁殖体。已有一些促进水角、莼菜等水生植物种子萌发的方法。狸藻作为沉水植物中的食虫植物，尚未有关于其种子萌发的相关技术。
技术实现思路
1、本发明目的是在于提供了一种促进狸藻种子萌发及幼苗存活的方法，提高有性繁殖产生的狸藻种子在自然条件下萌发率，从而提高了植株成活率。
2、为了达到上述技术的目的，本发明采用如下技术方案：
3、(1)狸藻种子的采集与保存
4、于2022年5-9月间断收集成熟的狸藻种子，地理坐标为江西省九江市濂溪区鄱阳湖植物园水生湿生植物资源圃。将收集的种子进行室内阴干，随后将狸藻种子置于有水的种子瓶中，低温冷藏处理30天，温度范围：0-4℃。
5、(2)狸藻种子活力测定
6、从冰箱中取出已处理的狸藻种子，室温放置24h，随机选取50粒狸藻种子。配制0.5％浓度ttc染液，用0.5％ ttc试剂处理狸藻种子，染色48h，同时避光保存。随后，在体式显微镜下进行染色计数，计算狸藻种子活力。计算公式(种子活力＝染色种子数/总种子数)。
7、(3)不同条件下狸藻种子的萌发
8、将前述已处理后放置室温的剩余狸藻种子取出，随机挑选用于萌发的狸藻种子，随机分7组，每组种子分别放置于直径为0.9cm培养皿中，加入1ml无菌水。设置萌发条件范围为：10-45℃(每跨越5℃范围一个萌发条件)，光周期12:12h，温变随光周期变化，白天比黑夜高5℃，光强3000lux，进行三个重复。以胚芽萌出0.2cm长度，视为有效萌发。每天统计萌发数，实验周期28天。最后统计狸藻种子萌发率，计算公式(萌发率＝萌发种子数/总种子数)。
9、(4)不同条件下狸藻萌发幼苗的存活率
10、将每组每天萌发的种子挑出，分别置于新的培养皿中，幼苗培养条件与其种子萌发条件相一致，培养20天后统计幼苗成活率。计算公式(成活率＝幼苗存活数/总的萌发种子数)。
11、在本发明中，狸藻种子活力检测结果为：统计发现，ttc染色后获得的狸藻种子活力为68％。
12、在本发明中，不同条件下狸藻种子的萌发率检测结果表明，步骤(3)中优选的萌发条件为15℃-35℃、光周期12:12h、温变随光周期变化、白天比黑夜高5℃、光强3000lux，开始萌发时间：第3天-第18天，优选的萌发率为：20.00％-67.33％。
13、在本发明中，不同条件下狸藻种子的萌发率检测结果表明，步骤(3)中优选的萌发条件为：20-35℃、光周期12:12h、温变随光周期变化、白天比黑夜高5℃、光强3000lux；存活率达100％。
14、在本发明中，步骤(3)中萌发条件为：30-35℃、光周期12:12h、温变随光周期变化、白天比黑夜高5℃、光强3000lux时，幼苗生长速率最快，活种子在此时的萌发率达99.01％。
15、本发明与现有技术相比，具有以下技术效果和优点：
16、水生植物种子的后熟及休眠作用是阻碍育种、育苗工作成功的关键，本发明通过先将狸藻种子进行低温湿润处理30天，然后在一定条件下进行萌发和幼苗培养，有效解决了水生植物种子休眠和后熟作用的技术瓶颈，主要解决了水生植物狸藻在自然生境下萌发率低等技术问题，通过本技术措施，狸藻种子萌发率高67.33％，活种子萌发率高达99.01％，且萌发时间短，萌发时间一致。与现有技术相比，本发明具有高效、成本低、易操作、管理方便、成活率高等优势，有效提高了狸藻种子的生态及科研的利用效率。
技术特征：1.一种促进狸藻种子萌发及幼苗存活的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种促进狸藻种子萌发及幼苗存活的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的萌发条件为15℃-35℃、光周期12:12h、温变随光周期变化、白天比黑夜高5℃、光强3000lux时，开始萌发时间：第3天－第18天，萌发率为20.00％-67.33％。
3.根据权利要求1所述的一种促进狸藻种子萌发及幼苗存活的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的萌发条件20-35℃、光周期12:12h、温变随光周期变化、白天比黑夜高5℃、光强3000lux时存活率为100％。
4.根据权利要求1所述的一种促进狸藻种子萌发及幼苗存活的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的萌发条件为30-35℃、光周期12:12h、温变随光周期变化、白天比黑夜高5℃、光强3000lux时，幼苗生长速率最快，活种子萌发率是99.01％。
技术总结本发明公开了一种促进狸藻种子萌发及幼苗存活的方法，步骤是(1)狸藻种子的采集与保存：每年收集成熟的狸藻种子，将狸藻种子置于有水的种子瓶中，低温冷藏；(2)狸藻种子活力测定：取出已低温处理的狸藻种子，室温放置，用TTC试剂处理狸藻种子，染色避光保存；(3)不同条件下狸藻种子萌发：将已室温放置的剩余狸藻种子取出，用于萌发，以胚芽萌出长度统计狸藻种子萌发率；(4)不同条件下狸藻萌发幼苗的存活率：将每组每天萌发的种子挑出，分别置于新培养皿中，幼苗培养条件与其种子萌发条件一致，培养后统计幼苗成活率。本发明具有成本低、容易操作、管理方便、成活率高等优势，有效提高了狸藻种子的生态及科研的利用效率。技术研发人员：陈陆丹,钟爱文,廖立冰,朱秋平,胡骞,周南方,刘送平,徐磊,梁同军,李丹丹,刘高原受保护的技术使用者：江西省中国科学院庐山植物园技术研发日：技术公布日：2024/1/12